Directed Evolution of Orthogonal Ligand Specificity in a Single Scaffold

Authors


  • We thank Ee-Lui Ang, Meng Chen, and Victor Gonzalez for technical assistance and helpful discussions. We also thank Carlos Barbas III for the gift of a plasmid containing the KRAB repressor, and Yingxiao Wang and Roger Tsien for the gift of mCherry and YFP plasmids. This research was supported by a National Science Foundation CAREER Award (BES-0348107).

Abstract

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Zwei hochempfindliche Ligand-Rezeptor-Paare, die auf einem einzigen Proteingerüst beruhen, sind zum nativen Ligand-Rezeptor-Paar und zueinander vollständig orthogonal. Alle drei Rezeptoren werden durch ihre jeweiligen Liganden (rote Elemente im Bild) spezifisch aktiviert, wenn mit ihnen die Expression von grün fluoreszierendem (obere Reihe), mCherry- (mittlere Reihe) und gelb fluoreszierendem Protein (untere Reihe) in Hefe nachgewiesen werden soll.

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