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RNA-Mediated Gene Assembly from DNA Arrays

Authors


  • This work was supported by the Wisconsin Center of Excellence in Genomics Science (USA), through NIH/NHGRI grant 1P50HG004952. We gratefully acknowledge Gloria M. Kreitinger for assistance with Figure preparation. We thank Yi-Chun Shih for helping with sequence designs. The ZsGreen1 encoding plasmid was a gift from Ya-Fang Chiu.

Abstract

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Gen-Genie: Der RNA-vermittelte Genaufbau gelingt ausgehend von Oligonucleotidsequenzen in einem DNA-Muster innerhalb eines Tages. An jedes oberflächengebundene Oligonucleotid wird ein T7-Promotor angehängt, und mithilfe von T7-RNA-Polymerase werden jeweils viele RNA-Kopien erzeugt (siehe Bild). Die RNA-Moleküle lagern sich über Hybridisierung und Ligation zum Volllängen-Transkript zusammen, das dann in einer Reverse-Transkriptase-Polymerasekettenreaktion in Doppelstrang-DNA übertragen wird.

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