Assembly and secretion of recombinant chains of human inter-α-trypsin inhibitor in COS-7 cells

Authors

  • Nathalie Martin-Vandelet,

    1. Laboratoire de Physiopathologie et Génétique Rénale et Pulmonaire, Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, INSERM Unité 295, Faculté de Médecine de Rouen, and IFR 61: physicochimie et biologie des systèmes intégrés.
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  • Sébastien Paris,

    1. Laboratoire de Physiopathologie et Génétique Rénale et Pulmonaire, Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, INSERM Unité 295, Faculté de Médecine de Rouen, and IFR 61: physicochimie et biologie des systèmes intégrés.
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  • Jeannette Bourguignon,

    1. Laboratoire de Physiopathologie et Génétique Rénale et Pulmonaire, Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, INSERM Unité 295, Faculté de Médecine de Rouen, and IFR 61: physicochimie et biologie des systèmes intégrés.
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  • Richard Sesboüé,

    1. Laboratoire de Physiopathologie et Génétique Rénale et Pulmonaire, Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, INSERM Unité 295, Faculté de Médecine de Rouen, and IFR 61: physicochimie et biologie des systèmes intégrés.
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  • Jean-Pierre Martin,

    1. Laboratoire de Physiopathologie et Génétique Rénale et Pulmonaire, Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, INSERM Unité 295, Faculté de Médecine de Rouen, and IFR 61: physicochimie et biologie des systèmes intégrés.
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  • Maryam Diarra-Mehrpour

    1. Laboratoire de Physiopathologie et Génétique Rénale et Pulmonaire, Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, INSERM Unité 295, Faculté de Médecine de Rouen, and IFR 61: physicochimie et biologie des systèmes intégrés.
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M. Diarra-Mehrpour, INSERM, Unité 295, Faculté de Médecine de Rouen, 22 Boulevard Gambetta, F-76183 Rouen Cedex, France. Tel. + 332 35 14 82 80; Fax: + 332 35 14 82 37;
E-mail: maryam.diarra-mehrpour@univ-rouen.fr

Abstract

The inter-α-trypsin inhibitor (ITI) family is a group of structurally related plasma serine protease inhibitors. The ITI family members consist of combinations of mature heavy chains named HC1, HC2, HC3 linked to bikunin (a Kunitz-type protease inhibitor) by a covalent interchain protein–glycosaminoglycan–protein cross-link. The biosynthesis of the ITI family members takes place in the liver. In this report we examine the biosynthesis of these proteins using transient transfected COS-7 cells expressing one or more combinations of human ITI chains. The processing and secretion of α1-microglobulin and bikunin does not require the ITI heavy chains. A small proportion of the H3 chain seems to be processed into the HC3 form in the absence of the other ITI chains. In contrast, the processing of H2 into HC2 needs the presence of the L chain. The COS-7 cells are able to link the HC2 and HC3 heavy chains with bikunin by means of a chondroitin sulfate bridge, and thus to generate 260-kDa ITI-like proteins as well as pre-α-trypsin inhibitor (PαI). However, the maturation of the Hl chain into HC1 and the assembly of HC1 inside multichain proteins may take place according to a mechanism which differs from that of the H2 and H3 chains. These results indicate that the assembly of the constituent chains of the ITI-like proteins and PαI is not dependent on the liver machinery.

Ancillary