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Keywords:

  • visceral leishmaniasis;
  • direct agglutination test;
  • freeze-dried antigen;
  • liquid antigen
  • Leishmaniose viscérale;
  • test d'agglutination directe;
  • antigène lyophilisé;
  • antigène liquide
  • Leishmaniasis Visceral;
  • Prueba de Aglutinación Directa;
  • antígeno congelado antígeno liofilizado;
  • antígeno líquido

Summary

Objective  The direct agglutination test (DAT) for visceral leishmaniasis (VL) with liquid (LQ) antigen is known to be only moderately reproducible because of inter-observer and batch-to-batch variability as well as its sensitivity to temperature and shaking during transport. We evaluated a DAT with freeze-dried (FD) antigen and compared it with the LQ antigen version.

Methods  Blood samples of clinical VL suspects and healthy endemic controls were collected in Sudan, Nepal and India. Both test versions were performed in duplicate in the respective countries and in the reference laboratory. Interbatch variability and stability tests were conducted and agreement was examined within and between centres on a dichotomic scale by Cohen's kappa as well as on a continuous scale through Bland–Altman plots.

Results  The FD antigen remains fully active even after storage at 45 °C for 24 months. Using a cut-off titre of 1 : 6400, the agreement between the FD and the LQ formats was excellent.

Conclusion  The major advantages of FD antigen are its better stability at higher temperatures and its longer shelf life, which make it much more suitable than the LQ version for use in the field.

Objectif  Le test d'agglutination directe basé sur l'antigène liquide (LQ DAT) pour la leishmaniose viscérale (LV) est connu pour être modérément reproductible à cause de la variabilité inter observateur et de lots à lots, ainsi qu'une sensibilitéà la température et à l'agitation lors du transport. Nous avons mené une évaluation détaillée d'une version lyophilisée du test (FD DAT) et les concordances avec le test (LQ DAT).

Méthode  Des échantillons cliniques de sang suspects LV et de contrôles sains de milieu endémique ont été collectés au Soudan, au Népal et en Inde. Les tests FD DAT et LQ DAT ont été appliqués en duplicats dans les pays d'origine et dans le laboratoire de référence. Des tests sur la variabilité inter lots et sur la stabilité ont été menés et les concordances ont été analysées au sein des sites et entre eux, sur une échelle dichotomique de la valeur du Kappa de Cohen ainsi que sur une échelle continue par le diagramme de Bland–Altman.

Résultats  L'antigène lyophilisé demeure encore totalement actif même une conservation à 45 °C pendant 24 mois. Une excellente concordance entre la version lyophilisée et la version liquide du test a été obtenue pour un titre seuil fixéà 1/6400.

Conclusion  L'avantage principal de l'antigène lyophilisé est sa stabilité meilleure à des températures plus élevées et sa plus longue durée de vie, qui la rendent plus appropriée que la version liquide pour une utilisation sur le terrain.

Objetivo  Se sabe que la Prueba de Aglutinación Directa (PAD) para la Leishmaniasis Visceral (LV) con antígeno líquido (PAD ALQ) es solo moderadamente reproducible debido a la variación inter-observador y a la variablidad entre lotes, así como por lo sensible que es a la temperatura y a la agitación durante el transporte. Hemos conducido una evaluación exhaustiva de una versión de la PAD con antígeno liofilizado (PAD ALF) y su concordancia con PAD ALQ.

Método  Se recogieron muestras de sangre de pacientes con sospecha clínica de LV y de controles sanos de áreas endémicas, en Sudán, Nepal e India. Tanto la PAD ALF como la PAD ALQ fueron realizadas por duplicado en los países respectivos y en un laboratorio de referencia. Se miraron la variabilidad entre lotes, las pruebas de estabilidad y la concordancia entre y dentro de los centros en una escala dicotómica utilizando la kappa de Cohen, así como en una escala continua mediante gráficos de Bland–Altman.

Resultados  El antígeno congelado estaba totalmente activo incluso después de guardarlo a 45 °C durante 24 meses. Utilizando como corte un título de 1 : 6400, la concordancia entre el antígeno congelado y el antígeno líquido fue excelente.

Conclusión  La principal ventaja del antígeno liofilizado es su mayor estabilidad a temperaturas más altas y una vida media más larga, que lo hace mucho más apropiado que la versión líquida para su uso en el campo.