SEARCH

SEARCH BY CITATION

Keywords:

  • buffy coat;
  • diagnosis;
  • Human African trypanosomiasis;
  • mini-anion exchange centrifugation technique (mAECT)
  • trypanosomiase humaine africaine;
  • diagnostic;
  • buffy coat;
  • mAECT
  • Tripanosomiasis humana africana;
  • diagnóstico;
  • capa leucocitaria;
  • mAECT

Summary

Objectives  To evaluate a modification of the mini anion exchange centrifugation test (mAECT) for the diagnosis of Trypanosoma brucei (T.b.) gambiense human African trypanosomiasis (HAT). To increase its sensitivity, this test uses 350 μl of buffy coat withdrawn from 5 ml of blood instead of blood.

Methods  The new protocol was first tested experimentally on serial dilution of trypanosomes and was then further evaluated under field conditions on 57 patients with HAT diagnosed during a medical survey in Guinea.

Results  Experimentally, the use of buffy coats improved mAECT sensitivity at least five fold and enabled to consistently detect parasites in blood at a concentration of 10 trypanosomes/ml. During the field evaluation, more patients tested positive by mAECT-bc (96.5%) than by mAECT-blood (78.9%, χ2 = 6.93, P = 0.008) and lymph juice examination (77.2%, χ2 = 7.67, P = 0.005). Furthermore, the number of parasites per collectors was significantly higher (7.2 vs. 2.6, P = 0.001) when buffy coats were used instead of blood.

Conclusion  The use of the mAECT-bc protocol enabled a significant improvement of HAT parasitological diagnosis in Guinea, without any additional costs. It would deserve to be tested in other T.b. gambiense endemic areas.

Diagnostic de maladie du sommeil: l’utilisation de ‘Buffy Coats’ améliore la sensibilité du test de la mini centrifugation àéchangeuse d’anion

Objectifs:  Evaluer une modification du test de la mini centrifugation àéchangeuse d’anion (mAECT) pour le diagnostic de la trypanosomiase humaine africaine (THA) àTrypanosoma brucei gambiense. Afin d’augmenter sa sensibilité, ce test utilise 350 μl de couenne leuco-plaquettaire (buffy-coat), prélevée sur 5 ml de sang au lieu de sang total.

Méthodes:  Le nouveau protocole a été testé sur des dilutions en série de trypanosomes et a ensuite étéévalué dans des conditions de terrain sur 57 patients THA diagnostiqués lors d’une enquête médicale en Guinée.

Résultats:  Expérimentalement, l’utilisation de ‘buffy coats’ a amélioré la sensibilité du test mAECT d’au moins cinq fois et a permis de détecter de façon consistante des parasites dans le sang à une concentration de 10 trypanosomes/ml. Au cours de l’évaluation sur le terrain, plus de patients ont été testés positifs par mAECT-bc (96,5%) que par mAECT-sang (78,9%; Chi2 = 6,93; p = 0,008) et l’examen du liquide lymphatique (77,2%; Chi2 = 7,67; p = 0,005). Le nombre de parasites par collecteur était significativement plus élevé (7,2 vs 2,6; p = 0,001) lorsque le ‘buffy coats’ plutôt que du sang étaient utilisé.

Conclusion:  L’utilisation du protocole mAECT-bc a permis une amélioration significative du diagnostic parasitologique de la THA en Guinée sans frais supplémentaires. Il mérite d’être testé sur Tb gambiense dans d’autres régions endémiques.

Diagnóstico de la enfermedad del sueño: el uso de la Capa Leucocitaria mejora la sensibilidad de la técnica de filtración en mini-columna de intercambio aniónico (mAECT)

Objetivos:  Evaluar una modificación de la técnica de filtración en mini-columna de intercambio aniónico (mAECT) para el diagnóstico de la tripanosomiasis humana Africana (THA) por Trypanosoma brucei gambiense. Con el fin de aumentar su sensibilidad, se utilizaron 350 μl de la capa leucocitaria (mAECT-cl) tomada a partir de 5 ml de sangre, en vez de sangre (mAECT-s).

Métodos:  El nuevo protocolo se probó primero experimentalmente en una dilución seriada de tripanosomas y después fué evaluado bajo condiciones de campo en 57 pacientes con THA, diagnosticados durante un estudio médico en Guinea.

Resultados:  Experimentalmente, el uso de la capa leucocitaria mejoró la sensibilidad del mAECT en al menos cinco veces, y permitió detectar consistentemente parásitos en sangre a una concentración 10 tripanosomas/ml. Durante la evaluación de campo, más pacientes dieron positivo por mAECT-cl (96.5%) que por mAECT-s (78.9%, Chi2=6.93, p=0.008) y examen de linfa (77.2%, Chi2=7.67, p=0.005). El número de parásitos por colector fue significativamente mayor (7.2 vs 2.6, p=0.001) cuando se recolectó la capa leucocitaria en vez de utilizar la sangre.

Conclusión:  El uso del protocolo mAECT-cl permitió mejoras significativas en el diagnóstico parasitológico de THA en Guinea, sin costes adicionales. Vale la pena probarlo en otras áreas endémicas para T.b. gambiense.