Standard karyotyping concentrates microfilaria and can be a valid concentrating technique for their detection

Authors


Corresponding Author Kanjaksha Ghosh, National Institute of Immunohaematology, 13 th Fl KEM Hospital, Parel., Mumbai 400012, India. E-mail: kanjakshaghosh@hotmail.com

Abstract

During karyotype preparation from the bone marrow aspirates of 209 haematological malignancy cases, microfilaria were detected in four samples, whereas routine marrow and peripheral blood smears of these four cases did not show any parasite. The patients were recalled, and their peripheral blood was processed by karyotyping and standard concentration techniques. Karyotype preparation from peripheral blood was performed with and without addition of colchicine. When the blood was processed for karyotyping with colchicine, microfilaria were detected in the peripheral blood of all four patients. In samples without added colchicine, no parasite was observed. The same samples were processed by Knott’s concentration technique, which showed microfilariae only in one of the four patients. Routine thick and thin smears of these patients showed no parasite. It seems that the standard karyotype preparation technique with colchicine concentrates the microfilariae in samples where parasite load is small and not demonstrable with standard techniques. Serological tests are available for W. bancrofti and costly, whereas no regular serodiagnosis is available for B. malayi. In a country like India, both parasites are endemic and patients are treated on clinical suspicion when parasitaemia could be low. Low parasitaemia is common because of repeated infection and partial immunity. In such circumstances, a cost-effective concentration technique like this may be useful.

Abstract

Lors de l’établissement du caryotype de ponctions de moelle osseuse de 209 cas d’hémopathie maligne, les microfilaires ont été détectées dans 4 échantillons, alors que les frottis de routine de la moelle et du sang périphérique de ces 4 cas n’ont pas révélé de parasite. Les patients ont été rappelés et leur sang périphérique a été traité pour le caryotypage et par les techniques de concentration standard. La préparation pour le caryotypage du sang périphérique a été réalisée avec et sans addition de la colchicine. Lorsque le sang a été traité avec de la colchicine pour le caryotypage, les microfilaires ont été détectées dans le sang périphérique de l’ensemble des 4 patients. Dans les échantillons préparés sans colchicine aucun parasite n’a été observé. Les mêmes échantillons ont été traités par la technique de concentration Knott, qui a révélé des microfilaires chez un seul des 4 patients. Les frottis minces et épais de routine de ces patients n’ont révélé aucun parasite. Il semble que la technique de préparation pour le caryotypage standard avec de la colchicine concentre les microfilaires dans les échantillons où la charge parasitaire est faible et non détectable avec des techniques standard. Des tests sérologiques sont disponibles pour W. bancrofti et sont coûteux, alors qu’aucun diagnostique sérologique courant n’est disponible pour B. malayi. Dans un pays comme l’Inde, les deux parasites sont endémiques et les patients sont traités sur base de la suspicion clinique lorsque la parasitémie paraît faible. La faible parasitémie est fréquente due à une infection répétée et une immunité partielle. Dans de telles circonstances une technique de concentration rentable telle que celle-ci peut être utile.

Abstract

Durante la preparación de cariotipos a partir de los aspirados de médula ósea de 209 casos de cáncer hematológico, se detectaron microfilarias en 4 muestras, mientras que las pruebas rutinarias de médula ósea y frotis de sangre periférica de estos 4 casos no mostraban ningún parásito. Se citó de nuevo a los pacientes y se procesó su sangre periférica para cariotipado y técnicas de concentración estándar. La preparación de los cariotipos a partir de sangre periférica se realizó con y sin añadir colchicina. Cuando se procesó la sangre para el cariotipado con colchicina, se detectaron microfilarias en la sangre periférica de los cuatro pacientes. En muestras sin añadir colchicina no se observaron parásitos. Las muestras se procesaron mediante la técnica de concentración de Knott, observándose microfilarias en uno de los 4 pacientes. En los frotis de sangre gruesa y delgada realizados de rutina a estos pacientes no se observaron parásitos. Parece que la técnica de preparación estándar de cariotipos con colchicina concentran las microfilarias en muestras en las que la carga parasitaria es pequeña y no demostrable mediante técnicas de diagnóstico estándar. Hay pruebas serológicas disponibles para W. bancrofti y son costosas, mientras que no hay un serodiagnóstico regular para B. malayi. En un país como la India, ambos parásitos son endémicos y los pacientes son tratados por una sospecha clínica cuando la parasitemia podría ser baja. La baja parasitemia es común debida a la infección repetitiva que provoca una inmunidad parcial. Bajo estas circunstancias, disponer de una técnica barata para concentrar la muestra, como la aquí descrita, sería muy útil.

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