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Keywords:

  • Plasmodium falciparum;
  • drug-resistant malaria;
  • pfdhps;
  • quadruple mutation;
  • sulphadoxine
  • Plasmodium falciparum;
  • paludisme résistant aux médicaments;
  • pfdhps;
  • mutation quadruple;
  • sulfadoxine
  • Plasmodium falciparum;
  • malaria resistente a medicamentos;
  • pfdhps;
  • mutación cuádruple;
  • sulfadoxina

Abstract

Objective  To evaluate the anti-folate (sulphadoxine)-resistant pattern in Kolkata, one of the malaria endemic zones of Eastern India.

Methods  At first, 107 P. falciparum suspected cases were enrolled in this study. Ninety isolates (84.11%) of 107 suspected cases were analysed, as they had mono-infection with P. falciparum. In vitro susceptibility assays were performed in all 90 isolates. Parasitic DNA was isolated by phenol-chloroform extraction method and polymerase chain reaction was followed by restriction fragment length polymorphism analysis of different codons of the pfdhps gene (436, 437, 540, 581 and 613).

Results  Among 90 isolates from Kolkata, dhps mutant isolates at codons 436, 437, 540, 581 and 613 were found in 53.33%, 67.78%, 46.66%, 15.56% and 45.55%, respectively. In vitro sulphadoxine resistance was found in 49 isolates (54.44%). Interestingly we found 33 isolates (36.67%) with quadruple AGEAT mutant allele, of which 32 isolates (96.97%) were highly sulphadoxine resistant (P < 0.01) in vitro.

Conclusion  Our present findings implicate that because of enormous drug (sulphfadoxine) pressure, novel AGEAT mutation was highly correlated (P < 0.01) with sulphadoxine resistance.

Objectif:  Evaluer le profile résistant anti-folate (sulfadoxine) à Kolkata, l’une des zones endémiques du paludisme dans l’est de l’Inde.

Méthodes:  Dans un premier temps, 107 cas suspects de P. falciparum ont été enrôlés dans cette étude. 90 isolats (84,11%) des 107 cas suspects ont été analysés, comme ils avaient des mono infections àP. falciparum. Des tests de susceptibilitéin vitro ont été réalisés sur tous les 90 isolats. L’ADN du parasite a été isolé par la méthode d’extraction au phénol chloroforme et la PCR a été réalisée suivie par l’analyse des fragments de restriction des différents codons du gène pfdhps (codons 436, 437, 540, 581et 613).

Résultats:  Parmi les 90 isolats de Kolkata, des isolats mutants pour le dhps au niveau des codons 436, 437, 540, 581 et 613 ont été retrouvés dans 53,33%, 67,78%, 46,66%, 15,56% et 45,55% respectivement. La résistance in vitroà la sulfadoxine a été trouvée chez 49 isolats (54,44%). De façon intéressante, nous avons trouvé 33 isolats (36,67%) avec une mutation quadruples de l’allèle AGEAT et 32 de ces isolats (96,97%) étaient hautement résistants à la sulfadoxine (P <0,01) in vitro.

Conclusion:  Nos résultats présents suggèrent qu’en raison de la forte pression du médicament (sulfadoxine) ces novelles mutations AGEAT étaient fortement corrélées (P <0,01) avec une résistance à la sulfadoxine.

Objetivo:  Evaluar los patrones de resistencia a antifolatos (sulfadoxina) en Kolkata, una zonas endémica para malaria de la India oriental.

Métodos:  En un principio se incluyeron en el estudio 107 casos con sospecha de infección por P. falciparum. Se analizaron 90 aislados (84.11%) de los 107 casos sospechosos, puesto que tenían una infección única con P. falciparum. Se realizaron pruebas de susceptibilidad in vitro a los 90 aislados. Se aisló ADN del parásito mediante el método de extracción con fenol-cloroformo y se realizó un análisis de polimorfismo de fragmentos de restricción de diferentes codones del gen pfdhps (436, 437, 540, 581 y 613).

Resultados:  Se hallaron mutaciones en los codones 436, 437, 540, 581 y 613 del gen dhps en un 53.33%, 67.78%, 46.66%, 15.56% y 45.55% de los 90 aislados de Kolkata, respectivamente. Se observó resistencia in vitro a la sulfadoxina en 49 aislados (54.44%). Más aún, encontramos 33 aislados (36.67%) que presentaban un alelo con mutación cuádruple AGEAT, y de estos 32 aislados (96.97%) tenían una alta resistencia in vitro a la sulfadoxina (P<0.01).

Conclusión:  Nuestros hallazgos muestran que, debido a la enorme presión ejercida por los fármacos (sulfadoxina) una nueva mutación AGEAT está significativamente relacionada (P < 0.01) con la resistencia a la sulfadoxina.