A case of a canine pigmented plaque associated with the presence of a Chi-papillomavirus

Authors


  • Sources of Funding
    This study was funded by the Krebsliga, Switzerland.

  • Conflict of Interest
    No conflicts of interest have been declared.

Professor Claude Favrot, Dermatology Department, Clinic for Small Animal internal Medicine, Vetsuisse Faculty, Winterthurerstrasse 260, CH-8057 Zürich, Switzerland. E-mail: cfavrot@vetclinics.uzh.ch

Abstract

The seven fully described canine papillomaviruses (CPVs) have been allocated by sequence comparison and other genetic features into three phylogenetic clades. This largely reflects clinical findings, so each sequence of a newly discovered CPV in combination with clinical and pathological details is a valuable piece of evidence. We hypothesize that the genomic sequence of a new CPV can help to predict clinical features and progression, and that this can be tested in subsequent cases.

In this case, a 2-year-old female dachshund-mix presented with papillomatosis clinically and histologically characterized as pigmented viral plaques. PCRs using primers evaluated for CPVs successfully amplified papillomavirus (PV) DNA. Sequencing of the products revealed an unknown PV putatively belonging to the PV genus Chi. Rolling circle amplification was used to amplify the entire viral genome. Sequencing revealed a novel PV, designated as CPV8, which was most closely related (63% homology) to the recently discovered CPV4. CPV4 is associated with benign pigmented plaques in pugs. Phylogenetic analysis based on the nucleotide sequences of four viral genes showed that the novel virus was closest to CPV3, CPV4 and CPV5. The presence of viral DNA was confirmed in the lesions by in situ hybridization using specific probes. CPV8 may consequently be regarded as the fourth member of the Chi-papillomavirus genus. All viruses belonging to this genus induce pigmented plaques in dogs.

These findings support the hypothesis that genomic sequences can be useful in predicting the clinical features of CPV infection.

Résumé

Les sept papillomavirus intégralement décrits (CPVs) ont été alloués au sein de trois clades phylogéniques par comparaison de séquence et d’autres caractéristiques génétiques. Ceci reflète largement les données cliniques, ainsi chaque nouvelle séquence de CPV découverte en association avec des données cliniques et histopathologiques sont des éléments de preuve précieux. Nous avons supposé que la séquence génomique d’un nouveau CPV peut aider à prédire l’évolution et les caractéristiques cliniques et que cela peut être testé dans d’autres cas. Dans ce cas, une femelle croisée Teckel de dix ans a présenté une papillomatose clinique et histopathologique, caractérisée par des plaques virales pigmentées. L’ADN de PV a été amplifié avec succès par PCR à l’aide de primers pour CPVs. Le séquençage des produits ont révélé un PV inconnu supposé appartenir au genre Chi. Une amplification par cycle roulant a été utilisée pour amplifier le génome viral. Le séquençage a révélé un nouveau PV, désigné come CPV8, qui était plus proche (63% homologie) du CPV4 récemment identifié. CPV4 est associé aux plaques pigmentées virales chez les carlins. Les analyses phylogéniques basées sur les séquences de nucléotides de 4 gènes viraux ont montré que ce nouveau virus était plus proche de CPV3, CPV4 et CPV5. La présence de l’ADN viral a été confirmée dans les lésions par hybridation in situà l’aide de sonde spécifiques. CPV8 peut donc être considéré comme le quatrième membre du genre Chi-papillomavirus. Tous les virus appartenant à ce genre induisent des plaques pigmentées chez les chiens. Ces données confirment l’hypothèse que les séquences génomiques peuvent être utiles en prédiction des caractéristiques cliniques des infections liées à CPV.

Resumen

Las siete variantes de papillomavirus caninos completamente descritas (CPVs) han sido clasificadas mediante comparación de la secuencia y otras características genéticas en tres grupos filogenéticos. Esto refleja en gran parte resultados clínicos, así que cada secuencia de un CPV nuevamente descubierto conjuntamente con los detalles clínicos y patológicos es una nueva pieza de evidencia realmente valiosa. Nuestra hipótesis es que la secuencia genómica de un nuevo CPV puede ayudar a predecir las características y progresión clínicas, y que esto se puede probar en casos sucesivos. En este caso, una hembra de raza mixta dachshund se presentó con papillomatosis clínica e histológica caracterizada por placas virales pigmentadas. La prueba de PCR prueba con iniciadores de CPVs amplificó con éxito DNA de PV. La secuenciación de la zona amplificada reveló un PV desconocido, supuestamente dentro del género chi de PV. Se utilizó una amplificación en círculo rodante para obtener la secuencia genómica completa. Esta secuenciación desveló un nuevo PV, designado CPV8, con mayor similitud (homología del 63%) con el CPV4 recientemente descubierto. CPV4 se ha descrito en placas pigmentadas benignas en perros Pug. El análisis filogenético basado en las secuencias de los cuatro genes virales demostró que el nuevo virus era mas cercano a CPV3, CPV4 y CPV5. La presencia de DNA vírico en las lesiones se confirmó mediante técnica de hibridación in situ utilizando oligonucleótidos específicos. CPV8 se puede por lo tanto considerar como el cuarto miembro del género chi de papillomavirus. Todos los virus que pertenecen a este género producen placas pigmentadas en perros. Estos resultados apoyan la hipótesis que las secuencias genómicas pueden ser útiles para predecir las características clínicas de la infección por CPV.

Zusammenfassung

Die sieben caninen Papillomaviren (CPVs) deren Genome vollständig sequenziert sind, wurden anhand von Sequenzvergleichen sowie anderen genetischen Eigenheiten drei verschieden Gruppen zugeordnet. Diese Zuordnung spiegelt zu einem gewissen Grad auch die entsprechenden Krankheitsbilder wieder. Jede Sequenz von neu entdeckten CPVs mit den zugehörigen klinischen und pathologischen Details stellt in diesem Zusammenhang einen weitern wertvollen Puzzlestein dar. Die Hypothese, dass die Sequenzen neuer PVs bei der Vorhersage von Klink und Krankheitsverlauf hilfreich sein können, kann dabei in jedem dieser Fälle neu geprüft werden. Eine zwei Jahre alte Dackelmischlingshündin mit klinischer Papillomatose wurde in diesem Zusammenhang untersucht. Die Veränderungen wurden klinisch wie histologisch als pigmentierte virale Plaques charakterisiert. Unter Verwendung für CPVs evaluierter Primer wurde in verschiedenen PCRs Papillomavirus DNA amplifiziert. Durch Sequenzierung der PCR Produkte wurde die Präsenz eines unbekannten, vermutlich dem PV-Genus Chi zugehörigen PVs bestätigt. Zur Amplifikation des kompletten viralen Genoms wurde die Rolling Circle Amplification angewendet. Nach Sequenzierung des kompletten Genoms des fortan als CPV8 bezeichneten Virus konnte als dessen nächster bekannter Verwandter CPV4 mit 63% Homologie identifiziert werden. CPV4 ist typischerweise mit pigmentierten Plaques beim Mops assoziiert. Durch eine phylogeneischer Analyse basierend auf vier viralen Genen konnte eine nahe Verwandtschaft zu CPV3, CPV4 und CPV5 ermittelt werden. Mittels spezifischer Sonden wurde in den Läsionen durch in situ Hybridisierung virale DNA nachgewiesen. CPV8 kann somit als bisher vierter Vertreter der Chi PVs angesehen werden. Alle Viren diese Genus` sind mit pigmentierten Plaques beim Hund assoziiert. Diese Ergebnisse unterstützen somit die Hypothese, dass die Gensequenz bei der Vorhersage der Klinik helfen kann.

Abstract

inline image

inline image

Ancillary