Anticonvulsant Drugs Determined by EMIT® in Spiked Brain Samples: A Correlation with HPLC Values

Authors


Clinica Neurologica, Viale S. Pietro 10, 07100 Sassari, Italy.

Abstract

Summary: Phenobarbital (PB), diphenylhydantoin (PHT) and carbamazepine (CBZ) levels were determined in spiked rat brain homogenates by means of the EMIT® assay, and these were compared with results obtained by high-pressure liquid chromatography (HPLC). The extraction procedure of the three drugs was identical for both methods, with minor modifications for EMIT (no addition of internal standard; reconstitution with the buffer used in routine plasma level analysis). Correlation coefficients between the data obtained by EMIT and HPLC were extremely good (PB, 0.90-0.98; PHT, 0.92-0.98; CBZ, 0.93-0.99). The results indicate that the EMIT system can detect PB, PHT, and CBZ in brain tissue with good accuracy, although HPLC remains the most accurate and proven method available for research purposes.

RESUMEN

Se han determinado los niveles de Fenobarbital (PB), difenilhidantoina (PHT) y carbamazepina (CBZ) en cerebros de ratas, homogeneizados mediante la técníca EMIT, y los resultados se han comparado con los obtenidos con cromatografía de líquidos a alta presión (HPLC). El procedimiento de extracción de las tres drogas ha sido idéntico para ambos métodos con mínimas modificaciones para la técnica EMIT (no incorporación de estandar interno; reconstitucion con el buffer usado en análisis de niveles plasmaticos rutinarios). Los coeficientes de correlacion entre la información obtenida con EMIT y HPLC fueron extremamente buenos (PB: 0.90-0.98; PHT: 0.92-0.98; CBZ: 0.93-0.99). Los resultados indican que el sistema EMIT puede detectar PB, PHT y CBZ en tejido cerebral con bastante exactitud, aunque HPLC continúa siendo el método más exacto y verificado para propósitos de investigación.

ZUSAMMENFASSUNG

Phenobarbital-(PB), Diphenylhydantoin-(PHT) und Carbamazepin-(CBZ) Spiegel wurden in “spiked” Homogenaten von Rattenhirn mit Hilfe der Emit-Technik untersucht und die Ergebnisse mit denen der Hochdruckflüssigkeitschromatographie (HPLC) ver-glichen. Die Extraktionsprozedur für die 3 Medi-kamente war bei beiden Methoden identisch mit einer kleinen Modifikation für die Emit-Methode (kein Hinzufügen eines internen Standards; Verwendung eines Puffers, wie er zur Routineanalyse der Plasma-Spiegel benutzt wird). Die Korrelationskoeffizienten zwischen den Daten der Emit- und der HPLC-Methoden waren äußerst günstig: (PB: 0,90-0,98; PHT: 0,92-0,98; CBZ: 0,93-0,99). Die Ergebnisse zeigen an, daß das Emit-System mit hoher Genauigkeit PB, PHT und CBZ im Hirngewebe entdecken kann, obgleich die HPLC-Methode die genaueste und am be-sten verlässliche Methode für Forschungszwecke bleibt.

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