Emergence of a new focus of Plasmodium malariae in forest villages of district Balaghat, Central India: implications for the diagnosis of malaria and its control

Authors


Corresponding Author Neeru Singh, Regional Medical Research Centre for Tribals (ICMR), Nagpur Road, Garha, Jabalpur 482003, Madhya Pradesh, India. E-mail: neeru.singh@gmail.com

Abstract

Objective  During an epidemiological study (January–July 2012) on malaria in forest villages of Central India, Plasmodium malariae-like malaria parasites were observed in blood smears of fever cases. We aimed to confirm the presence of P. malariae using molecular tools i.e. species-specific nested polymerase chain reaction (PCR) and DNA sequencing.

Methods  All fever cases or cases with history of fever in 25 villages of Balaghat district were screened for malaria parasite using bivalent rapid diagnostic test and microscopy after obtaining written informed consent. Nested PCR was employed on microscopically suspected P. malariae cases. DNA sequences in the target region for PCR diagnosis were analysed for all the suspected cases of P. malariae.

Results  Among the 22 microscopy suspected P. malariae cases, nested PCR confirmed the identity of P. malariae in 19 cases. Among these 14 were mono P. malariae infections, three were mixed infection of P. malariae with Plasmodium falciparum and two were mixed infection of P. malariae with Plasmodium vivax. Clinically P. malariae subjects generally presented with fever and headache. However, the typical 3-day pattern of quantum malaria was not observed. The parasite density of P. malariae was significantly lower than that of P. vivax and P. falciparum.

Discussions  Plasmodium malariae may have been in existence in forest villages of central India but escaped identification due to its close resemblance to P. vivax. The results re-affirm the importance of molecular methods of testing on routine basis for efficacious control strategies against malaria.

Abstract

Objectif

Au cours d'une étude épidémiologique du paludisme (janvier-juillet 2012) dans des villages forestiers du centre de l'Inde, des parasites du paludisme semblables à Plasmodium malariae ont été observés dans les frottis sanguins des cas de fièvre. Nous avons cherché à confirmer la présence de P. malariae à l'aide d'outils moléculaires spécifiques pour l'espèce: la réaction en chaîne par polymérase (PCR) nichée et le séquençage de l’ADN.

Méthodes

Tous les cas de fièvre ou les cas ayant des antécédents de fièvre dans 25 villages du district de Balaghat ont été testés pour le parasite du paludisme en utilisant le test bivalent de diagnostic rapide (TDR) et la microscopie après avoir obtenu le consentement éclairé écrit. La PCR nichée a été appliquée sur les cas suspects au microscope de P. malariae. Les séquences d’ADN dans la région cible pour le diagnostic par PCR ont été analysées pour tous les cas suspects de P. malariae.

Résultats

Parmi les 22 cas suspects de P. malariae à la microscopie, la PCR nichée a confirmé l'identité de P. malariae dans 19 cas. Parmi ceux-ci, 14 étaient des mono infections à P. malariae, 3 étaient des infections mixtes de P. malariae et de P. falciparum et 2 étaient une infection mixte à P. malariae et P. vivax. Cliniquement, les sujets infectés par P. malariae présentent généralement de la fièvre et des maux de tête. Cependant, le profil typique de 3 jours de malaria quantique n'a pas été observé. La densité du parasite était significativement plus faible avec P. malariae qu'avec P. vivax et P. falciparum.

Discussions

P. malariae pourrait avoir existé dans les villages forestiers de l'Inde centrale mais aurait échappé de l'identification en raison de son étroite ressemblance avec P. vivax. Les résultats réaffirment l'importance des méthodes moléculaires comme tests de routine pour les stratégies de lutte efficaces contre le paludisme.

Abstract

Objetivo

Durante un estudio epidemiológico de malaria (Enero-Julio 2012) en poblados forestales de la zona central de la India, se observaron parásitos del tipo Plasmodium malariae en láminas de pacientes con fiebre. El objetivo de este estudio era confirmar la presencia de P. malariae utilizando herramientas moleculares: una PCR anidada especie-específica (PCR) y secuenciación del ADN.

Métodos

A todos los casos de fiebre o casos con historia de fiebre en 25 poblados del distrito de Balaghat, se les realizaron pruebas en busca del parásito de la malaria, utilizando pruebas de diagnóstico rápido (PDR) y microscopía, después de haber obtenido un consentimiento informado por escrito. La PCR anidada se utilizó en los casos con sospecha microscópica de P. malariae. La secuencias de la región de ADN utilizada para el diagnóstico por PCR fueron analizadas en todos los casos con sospecha de P. malariae.

Resultados

De los 22 casos sospechosos por microscopía de infección con P. malariae, la PCR anidada confirmó la identidad del parásito en 19 de ellos. Entre estos, 14 eran infecciones solo con P. malariae, 3 eran infecciones mixtas de P. malariae con P. falciparum y 2 eran infecciones mixtas de P. malariae con P. vivax. Desde un punto de vista clínico, los sujetos con infección por P. malariae generalmente presentaban fiebre y dolor de cabeza, pero no se observaba el típico patrón de 3 días de la malaria. La densidad parasitaria de P. malariae era significativamente menor que la de P. vivax y la de P. falciparum.

Discusión

P. malariae puede haber estado presente en poblados forestales del centro de India y haber escapado a su identificación por su gran parecido con P. vivax. Los resultados reafirman la importancia de los métodos moleculares para realizar pruebas rutinarias a la hora de contar con estrategias eficaces para el control de la malaria.

Ancillary