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Background

A previous study demonstrated that the cysteine protease of Dermatophagoides farinae induced production of granulocyte–macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) in a canine epidermal keratinocyte progenitor cell line (CPEK); however, the molecular mechanism has not been elucidated.

Hypothesis/Objectives

Given that the transcription of GM-CSF mRNA in human lymphocytes is mainly regulated by the nuclear factor of activated T cells (NFAT), it is hypothesized that NFAT also contributes to GM-CSF production in canine keratinocytes stimulated with a cysteine protease.

Methods

Nuclear translocation of NFAT was evaluated in CPEK cells in the absence or presence of the cysteine protease papain. We also investigated whether blockade of NFAT could inhibit GM-CSF production.

Results

Papain-induced nuclear translocation of NFAT, producing GM-CSF, was partly inhibited by ciclosporin.

Conclusions and clinical importance

The results suggest that GM-CSF production mediated by the cysteine protease is regulated not only by NFAT but also by unknown signalling pathways in canine keratinocytes.

Résumé

Contexte

Une précédente étude a démontré que la protéase à cystéine de Dermatophagoides farinae induit la production de GM-CSF (granulocyte–macrophage colony-stimulating factor) au sein des lignées cellulaires souches des kératinocytes épidermiques canins (CPEK); cependant, le mécanisme moléculaire n'a pas été déterminé.

Hypothèses/Objectifs

Etant donné que la transcription de l'ARNm de GM-CSF des lymphocytes humains est principalement régulée par le facteur nucléaire de cellules T activées (NFAT), il a été supposé que le NFAT contribue également à la production de GM-CSF dans les kératinocytes canins stimulés par une protéase à cystéine.

Méthodes

La translocation nucléaire du NFAT a été évaluée dans les cellules CPEK en absence ou en présence de la protéase à cystéine papaïne. Nous avons également étudié si le blocage de NFAT pourrait inhiber la production de GM-CSF.

Résultats

La ciclosporine a partiellement inhibé la translocation nucléaire de NFAT, produisant GM-CSF, induite par la papaïne.

Conclusions et importance clinique

Les résultats suggèrent que la production de GM-CSF médiée par la protéase à cystéine n'est pas seulement régulée pas le NFAT mais aussi par des voies encore inconnues dans les kératinocytes canins.

Resumen

Introducción

un estudio previo ha demostrado que la cisteín-proteasa del ácaro Dermatophagoides farinae induce la producción del factor estimulante del crecimiento de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF) en una línea celular de progenitores de queratinocitos epidermales caninos (CEPK); sin embargo el mecanismo molecular implicado no ha sido determinado.

Hipótesis/Objetivos

dado que la transcripción del GM-CSF mRNA en linfocitos humanos está fundamentalmente regulada por el factor nuclear de linfocitos T activados (NFAT), se plantea la hipótesis de que NFAT también contribuye a la producción de GM-CSF en queratinocitos caninos estimulados por una cisteín-proteasa.

Métodos

se evaluó la translocación nuclear del NFAT en células CEPK en ausencia o en presencia de la cisteín-proteasas papaína. También investigamos si el bloqueo de NFAT podría inhibir la producción de GM-CSF.

Resultados

la translocación nuclear de NFAT inducida por papaína, la cual producía GM-CSF, fue parcialmente inhibida por ciclosporina.

Conclusiones e importancia clínica

los resultados sugieren que la producción de GM-CSF mediada por cisteín-proteasa se regula no solo por NFAT sino también por otras rutas desconocidas de señalización intracelular en queratinocitos caninos.

Zusammenfassung

Hintergrund

Eine frühere Studie zeigte, dass die Cysteinprotease von Dermatophagoides farinae die Produktion des Granulozyten-Makrophagen Kolonie-stimulierenden Faktors (GM-CSF) in der caninen epidermalen Keratinozyten Progenitor Zelllinie (CPEK) induzierte; die molekularen Mechanismen wurden jedoch nicht beleuchtet.

Hypothese /Ziele

Vorausgesetzt, dass die Transkription der GM-CSF mRNA in menschlichen Lymphozyten hauptsächlich durch den Nuklearfaktor der aktivierten T-Zellen (NFAT) reguliert wird, wird die Hypothese aufgestellt, dass NFAT auch zur GM-CSF Produktion in caninen Keratinozyten beiträgt, die durch eine Cystein Protease stimuliert werden.

Methoden

Die nukleäre Translokation von NFAT wurde in CPEK Zellen in Abwesenheit oder bei Vorhandensein des Papain der Cystein Protease evaluiert. Wir untersuchten auch die Tatsache, ob eine Blockade von NFAT die GM-CSF Produktion beeinträchtigen könnte.

Ergebnisse

Die Papain-induzierte nukleäre Translokation, welche GM-CSF produziert, wurde teilweise durch Ciclosporin inhibiert.

Schlussfolgerungen und klinische Bedeutung

Die Ergebnisse lassen darauf schließen, dass die GM-CSF Produktion, die durch die Cystein Protease eingeleitet wird, nicht nur durch NFAT reguliert wird, sondern auch von unbekannten Signalwegen in den caninen Keratinozyten.

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