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Background

Demodex gatoi causes a pruritic dermatitis in cats. Diagnosis requires the demonstration of mites using superficial skin scrapings or faecal flotation, which can be insensitive.

Hypothesis/Objectives

The goal of this study was to develop a molecular method to diagnose D. gatoi infection in cats and distinguish these mites from Demodex cati.

Animals

Fifty-three shelter cats, 11 cats from a closed research colony and 12 privately owned cats were used.

Methods

Demodex gatoi and D. cati were obtained from scrapings of cat skin. The 16S rRNA DNA was amplified by PCR, sequenced and compared with available Demodex sequences. Hair and skin samples were also collected for microscopic examination and DNA isolation.

Results

DNA sequences were obtained from D. gatoi and D. cati. qPCR with D. gatoi specific primers and probe amplified DNA isolated from D. gatoi and not D. cati. Conversely, D. cati qPCR primers and probe amplified D. cati DNA and not D. gatoi.

Five of the shelter cats were positive for D. gatoi. Two of these cats were pruritic, and the other three were in contact with these cats. Only one cat was positive for D. gatoi on skin scraping but was negative for D. gatoi or D. cati DNA.

Conclusion

Results from this study show D. gatoi and D. cati to be distinct species. A novel qPCR test for the identification and differentiation of D. gatoi and D. cati was developed. Once optimized, this test could provide a valuable technique for the diagnosis of D. gatoi infection.

Résumé

Contexte

Demodex gatoi cause une dermatite prurigineuse chez le chat. Le diagnostic passe par la mise en évidence d'acariens à l'aide de raclages cutanés ou par flottation fécale qui peuvent ne pas être sensibles.

Hypothèses/Objectifs

Le but de cette étude était de développer une méthode moléculaire de diagnostic d'infection à D. gatoi chez le chat et de différencier ces acariens de Demodex cati.

Sujets

Cinquante-trois chats de refuge, 11 chats d'un groupe de recherche et 12 chats de propriétaires ont été inclus.

Méthodes

Demodex gatoi et D. cati ont été obtenu par racages cutanés des chats. L'ADN 16S rRNA a été amplifié par PCR, séquencé et comparé avec des séquences disponibles de Demodex. Des échantillons de poils et de peau ont aussi été prélevés pour examen microscopique et isolement d’ADN.

Résultats

Les séquences d’ADN ont été obtenues de D. gatoi et D. cati. La PCRq avec sondes et amorces spécifiques de D. gatoi a amplifié l’ADN isolé de D. gatoi et pas D. cati. Inversement, la PCRq avec sondes et amorces spécifiques de D. cati a amplifié l’ADN de D. cati et pas D. gatoi.

Cinq des chats du refuge étaient positifs pour D. gatoi. Deux de ces chats étaient prurigineux et les trois autres étaient en contact avec ces chats. Seulement un chat était positif pour D. gatoi sur les raclages cutanés mais était négatif pour l’ADN de D. gatoi ou D. cati.

Conclusion

Les résultats de cette étude montrent que D. gatoi et D. cati sont deux espèces distinctes. Un nouveau test PCRq d'identification et de différenciation de D. gatoi et D. cati a été développé. Une fois optimisé, ce test pourrait fournir une technique valable pour le diagnostic de l'infection à D. gatoi.

Resumen

Introducción

Demodex gatoi causa una dermatitis pruriginosa en gatos. El diagnóstico requiere la demostración de los ácaros utilizando raspados superficiales o flotación fecal, que pueden ser poco sensibles.

Hipótesis/Objetivos

el propósito de este estudio fue desarrollar un método de diagnóstico molecular para la detección de la infección por D. gatoi y distinguir estos ácaros de Demodex cati.

Animales

Se utilizaron cincuenta y tres gatos de un centro de acogida, 11 gatos de una colonia de investigación cerrada y doce gatos de propietarios privados.

Métodos

Se obtuvieron D. gatoi and D. cati mediante raspados de la piel. Se amplificó mediante PCR el DNA del gen 16S rRNA, se secuenció y se comparó con la secuencias disponibles de Demodex. Se tomaron también pelo y biopsias de piel para su evaluación microscópica y aislamiento de DNA.

Resultados

Se obtuvieron las secuencias de DNA de D. gatoi y D. cati. PCR cuantitativa con iniciadores y sonda específicos de D. gatoi amplificó DNA aislado de D. gatoi y no D. cati. Por el contrario, PCR cuantitativa con iniciadores y sonda específicos de D. cati amplificaron DNA de D. cati y no D. gatoi.

Cinco de los gatos del centro de acogida fueron positivos para D. gatoi. Dos de estos gatos tenían prurito, y los otros tres estaban en contacto con estos gatos. Un solo gato fue positivo para D. gatoi en raspados de piel pero fue negativo para DNA de D. gatoi o D. cati.

Conclusiones e importancia clínica

Los resultados de este estudio muestran que D. gatoi y D. cati son especies distintas. Se desarrolla una nueva prueba de PCR cuantitativa para la identificación y diferenciación de D. gatoi y D. cati. Una vez optimizada, esta prueba puede ser una técnica valiosa para el diagnóstico de la infección por D. gatoi.

Zusammenfassung

Hintergrund

Demodex gatoi verursacht eine juckende Dermatitis bei Katzen. Für die Diagnose ist die Demonstration der Milben in einem oberflächlichen Hautgeschabsel oder mittel Fäkalflotation, welche nicht sehr sensitiv sein kann, notwendig.

Hypothese / Ziele

Das Ziel dieser Studie war die Entwicklung einer molekularen Methode, um D. gatoi Infektionen bei Katzen zu diagnostizieren und diese von Demodex cati zu unterscheiden.

Tiere

Dreiundfünfzig Katzen aus Tierheimen, 11 Katzen aus einer geschlossenen Forschungskolonie und 12 Katzen in Privatbesitz wurden verwendet.

Methoden

Demodex gatoi und D. cati wurden von Hautgeschabseln der Katzenhaut gewonnen. Die 16S rRNA DNA wurde mittels PCR amplifiziert, sequenziert und mit vorhandenen Demodex Sequenzen verglichen. Haar und Hautproben wurden ebenfalls für eine mikroskopische Untersuchung und für DNA Isolation gesammelt.

Ergebnisse

DNA Sequenzen wurden von D. gatoi und D. cati gewonnen. qPCR mit D. gatoi spezifischen Primern und Proben amplifizierte DNA, die aus D. gatoi und nicht aus D. cati isoliert worden war. Im Gegensatz dazu amplifizerten die Primer und die Probe des D. cati qPCR D. cati DNA und nicht D. gatoi.

Fünf Katzen aus den Tierheimen waren positiv für D. gatoi. Zwei dieser Katzen zeigten Juckreiz und die anderen drei hatten Kontakt mit diesen Katzen. Nur eine Katze war D. gatoi positiv im Hautgeschabsel, aber negativ für D. gatoi und D. cati DNA.

Schlussfolgerung

Die Ergebnisse dieser Studie zeigen, dass D. gatoi und D. cati unterschiedliche Spezies sein können. Ein neuer qPCR zur Identifizierung und Differenzierung von D. gatoi und D. cati wurde entwickelt. Wenn dieser Test optimiert ist, dann könnte er eine wertvolle Technik zur Diagnose von D. gatoi Infektionen darstellen.

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