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Background

Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa commonly complicates chronic bacterial otitis in dogs.

Hypothesis/Objectives

The aim of this in vitro study was to determine the effect of ethylenediaminetetraacetic acid–tromethamine (Tris–EDTA) on the minimal bactericidal concentrations (MBCs) and minimal inhibitory concentrations (MICs) of marbofloxacin and gentamicin for multidrug-resistant P. aeruginosa isolates from cases of canine otitis.

Methods

Eleven isolates were identified as multidrug resistant on disc diffusion; 10 were resistant to marbofloxacin and two were resistant to gentamicin. Isolates were incubated for 90 min with each antibiotic alone and in combination with Tris–EDTA at concentrations of 0.075 μg/mL to 5 mg/mL for marbofloxacin, 0.001 μg/mL to 10 mg/mL for gentamicin and 17.8:4.7 to 0.14:0.04 mg/mL for Tris–EDTA. Positive and negative controls were included. Aliquots of each antibiotic and/or Tris–EDTA concentration were subsequently transferred to sheep blood agar to determine the MBCs, and tryptone soy broth was added to the remaining suspensions to determine the MICs.

Results

Tris–EDTA alone was bacteriostatic but not bactericidal at any concentration. The addition of Tris–EDTA significantly reduced the median MBC (from 625 to 468.8 μg/mL; < 0.001) and MIC (from 29.3 to 2.4 μg/mL; = 0.008) of marbofloxacin, and the median MBC (from 625 to 39.1 μg/mL) and MIC (from 19.5 to 1.2 μg/mL) of gentamicin (both < 0.001).

Conclusions and clinical importance

Tris–EDTA significantly reduced the MBCs and MICs of marbofloxacin and gentamicin for multidrug-resistant P. aeruginosa in vitro. This may be of use to clinicians managing these infections in dogs.

Résumé

Contexte

Les otites bactériennes chroniques canines sont fréquemment compliquées par des Pseudomonas aeruginosa multi-résistantes.

Hypothèses/Objectifs

Le but de cette étude in vitro était de déterminer l'effet du Tris-EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid–tromethamine) sur les concentrations minimales bactéricides (MBCs) et les concentrations minimales inhibitrices (MICs) de la marbofloxacine et de la gentamicine pour les souches de P. aeruginosa multi-résistantes issues de cas d'otite canine.

Méthodes

Onze souches ont été identifiées comme multi-résistantes sur disque de diffusion ; 10 étaient résistantes à la marbofloxacine et deux étaient résistantes à la gentamicine. Les souches ont été incubées pendant 90 minutes avec chaque antibiotique seul et en combinaison avec le Tris-EDTA avec des concentrations de marbofloxacine de 0.075 µg/mL à 5 mg/mL, de gentamicine de 0.001 µg/mL à 10 mg/mL et de Tris-EDTA de 17.8:4.7 to 0.14:0.04 mg mL. Les contrôles positifs et négatifs ont été inclus. Une certaine quantité de chaque antibiotique et/ou de Tris-EDTA a été ensuite transférée sur gélose au sang de mouton afin de déterminer les MBCs, et du bouillon tryptone soja a été ajouté aux suspensions restantes pour déterminer les MICs.

Résultats

Le Tris-EDTA seul a été bactériostatique mais pas bactéricide quelque soit la concentration. L'ajout de Tris-EDTA a réduit significativement la MBC médiane (de 625 à 468.8 µg/mL; < 0.001) et la MIC (de 29.3 à 2.4 µg/mL; = 0.008) de la marbofloxacine, et la MBC médiane (de 625 à 39.1 µg/mL) et la MIC (de 19.5 à 1.2 µg/mL) de la gentamicine (< 0.001).

Conclusions et importance clinique

Le Tris-EDTA diminue significativement les MBCs et les MICs de la marbofloxacine et de la gentamicine pour les P. aeruginosa in vitro multi-résistantes. Ceci pourrait être utile aux cliniciens afin de gérer ces infections chez le chien.

Resumen

Introducción

Pseudomonas aeruginosa resistente a múltiples antibacterianos complica con frecuencia casos de otitis crónica bacteriana en perros.

Hipótesis/Objetivos

el propósito de este estudio in vitro fue determinar el efecto de ácido etilendiaminotetraacetico-trometamina (Tris-EDTA) en las concentraciones mínimas bactericidas (MBCs) y concentraciones inhibitorias mínimas (MICs) de marbofloxacina y gentamicina para aislados de P. aeruginosa multiresistente de casos de otitis canina.

Métodos

once aislados se identificaron como multiresistentes mediante difusión en disco; 10 fueron resistentes a marbofloxacina y dos resistentes a gentamicina. Los aislados se incubaron durante 90 minutos con cada antibiótico por si solo o en combinación con Tris-EDTA a concentraciones de 0,075 μg/mL a 5 mg/mL para marbofloxacina; 0,001 μg/mL a 10 mg/mL para gentamicina y 17,8: 4,7 a 0,14: 0,04 mg/mL de Tris-EDTA. Se incluyeron controles positivos y negativos. Alícuotas de cada concentración de antibiótico y/o Tris-EDTA fueron después transferidos a placas de agar con sangre de oveja para determinar la MBCs, y caldo de triptona de soja fue añadido a las suspensiones restantes para determinar las MICs.

Resultados

Tris-EDTA sólo fue bacteriostático pero no bactericida a ninguna concentración. La adición de Tris-EDTA redujo significativamente la media MBC (de 625 a 468,8 μg/mL; < 0,001) y MIC (de 29,3 a 2,4 μg/mL; = 0,008 de marbofloxacina y la media de MBC (625 a 39,1 μg/mL) y MIC (de 19,5 a 1,2 μg/mL) de gentamicina (en ambos < 0,001).

Conclusiones e importancia clínica

Tris-EDTA redujo significativamente las MBCs y MICs de marbofloxacina y gentamicina para P. aeruginosa multiresistente in vitro. Esto puede ser de utilidad para los clínicos en el manejo de estas infecciones en perros.

Zusammenfassung

Hintergrund

Der auf viele Wirkstoffe resistente Pseudomonas aeruginosa verkompliziert häufig chronisch bakterielle Otitiden von Hunden.

Hypothese/Ziele

Das Ziel dieser in vitro Studie war es, die Wirksamkeit von ethylendiamintetraessigsaurem Tromethamin (Tris-EDTA) auf die minimalen bakteriziden Konzentrationen (MBCs) und die minimalen inhibitorischen Konzentrationen (MICs) von Marbofloxacin und Gentamicin gegenüber multiresistenten P. aeruginosa Isolaten bei Otitisfällen von Hunden zu bestimmen.

Methoden

Elf Isolate wurden mittels Diskdiffusion als multiresistent identifiziert; 10 waren resistent gegenüber Marbofloxacin und zwei waren resistent gegenüber Gentamicin. Die Isolate wurden 90 Minuten lang mit jedem einzelnen Antibiotikum und in Kombination mit Tris-EDTA bei Konzentrationen von 0,075 μg/mL bis 5 mg/mL für Marbofloxacin, 0,001 μg/mL bis 10 mg/mL für Gentamicin und 17,8:4,7 bis 0,14:0,04 mg/mL für Tris-EDTA inkubiert. Es wurden positive und negative Kontrollen inkludiert. In der Folge wurden Aliquote für jedes Antibiotikum und/oder jede Tris-EDTA Konzentration auf Schafsblutagar transferiert, um die MBCs zu bestimmen, Trypton Sojabrühe wurde den übrigen Suspensionen beigefügt um die MICs zu bestimmen.

Ergebnisse

Tris-EDTA alleine wirkte bakteriostatisch aber bei keiner Konzentration bakterizid. Der Zusatz von Tris-EDTA reduzierte den Medianwert der MBC (von 625 bis 468,8 μg/mL; < 0,001) und die MIC (von 29,3 bis 2,4 μg/mL; P = 0,008) für Marbofloxacin, und den Medianwert der MBC (von 625 auf 39,1 μg/mL) und die MIC (von 19,5 bis 1,2 μg/mL) für Gentamicin (beide < 0,001) signifikant.

Schlußfolgerung und klinische Bedeutung

Tris-EDTA reduzierte in vitro die MBCs und MICs für Marbofloxacin und Gentamicin gegenüber einem multiresistenten P. aeruginosa signifikant. Dieses Ergebnis könnte für Kliniker beim Management dieser Infektionen von Hunden wichtig sein.

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